Resumo A contaminação ambiental com metais pesados é uma ameaça aos organismos devido à sua toxicidade, persistência e bioacumulação nas cadeias alimentares. O estudo teve como objetivo avaliar o efeito do Cd sobre o nível de Ca em ossos de peixes de água doce Channa gachua. Quarenta e dois indivíduos de peixes foram mantidos em seis aquários; marcado aq. 0, 1, 2, 3, 4 e 5 no laboratório para tratamento. Aq. 0 foi o grupo controle e aq. 1, 2, 3, 4, 5 foram experimentais com solução de tratamento de Cd 0, 0,1 ppm, 0,5 ppm, 1 ppm, 2,5 ppm e 5 ppm respectivamente por três meses. Após a exposição, o tecido ósseo foi examinado quanto ao acúmulo de Cd e concentração de Ca. O maior acúmulo de Cd foi registrado em aq. 5 com média de 46,86 ± 0,46 mgkg-1 e o menor no grupo controle com média de 0,61 ± 0,06 mgkg-1. A ordem de bioacumulação de Cd nos ossos foi aq. 5 > aq. 4 > aq. 3 > aq. 2 > aq. 1 > aq. 0. A concentração mais alta de Ca foi observada em aq. 0 (grupo controle) média de 7.888,06 ± 4.827,22 mgkg-1 e a mais baixa foi de 1.132,36 ± 203,73 mgkg-1 em aq. 5 (a 5,0 ppm). Geralmente um padrão de diminuição do nível de Ca foi observado com cada aumento da bioacumulação de Cd aq. 0 > aq. 1 > aq. 2 > aq. 3 > aq. 4 > aq. 5. O estudo atual indicou que o acúmulo de Cd tem efeito substancial no nível de Ca nos ossos e, portanto, no sistema esquelético. Regras estritas devem ser implementadas pelo governo para controlar a poluição por metais e a exploração da biota.

Abstract Environmental contamination with heavy metals is a threat to the organisms due to their toxicity, persistence and bioaccumulation in food chains. The study was aimed to assess cadmium (Cd) effect on calcium (Ca) level in bones of a freshwater fish Channa gachua. 42 fish individuals were kept into six (6) aquaria; labelled aq.0, 1, 2, 3,4 and 5 in the laboratory for treatment. Aq.0 was control group and aq.1, 2,3,4,5 were experimental with treatment solution of Cd 0, 0.1ppm, 0.5ppm, 1ppm, 2.5ppm and 5ppm respectively for three months. After exposure, bones tissue were examined for Cd accumulation and Ca concentration. Highest accumulation of Cd were recorded in aq.5 mean 46.86 ± 0.46 mgkg-1 .and lowest in the control group with mean 0.61 ± 0.06 mgkg-1. The order of Cd bioaccumulation in bones were aq.5 > aq.4 >aq.3 > aq.2 > aq.1 > aq.0. Highest concentration of Ca were noted in aq.0 (Control group) mean 7888.06 ± 4827.22 mgkg-1 and lowest were 1132.36 ± 203.73 mgkg-1 in aq.5 (at 5.0 ppm). Generally a pattern of decreasing Ca level were observed with each rise of Cd bioaccumulation aq.0 > aq.1 > aq.2 > aq.3 > aq.4 > aq.5. Current study indicated that Cd accumulation have substantial effect on Ca level in bones and hence on skeleton system. Strict rules must be implemented by government to control metals pollution and exploitations of biota.

Resumo Esta pesquisa teve como objetivo investigar várias atividades mosquitocidas do extrato n-hexano de planta inteira de Chenopodium botrys contra Culex quinquefasciatus. O extrato mostrou atividades larvicida, pupicida, adulticida, dissuasora de oviposição e inibidora da emergência de adultos contra a Cx. quinquefasciatus. Durante as atividades larvicida e pupicida, a concentração letal de 24 horas (CL50) do extrato contra larvas de 2º estádio, larvas de 4º estádio e pupa foi de 324,6, 495,6 e 950,8 ppm, respectivamente. Durante o bioensaio com frasco do CDC (Centros para Controle e Prevenção de Doenças) para adulticida, o tempo médio de desativação (KDT50) na concentração de 1,25% foi de 123,4 minutos. Durante o bioensaio de impregnação com papel de filtro para a atividade adulticida do extrato, o valor KDT50 na concentração de 0,138 mg / cm2 foi de 48,6 minutos. O extrato foi fracionado em 14 frações através de cromatografia em coluna de gel de sílica que foram então combinadas em seis frações com base em um valor de fator de retenção (Rf) semelhante. Essas frações foram selecionadas quanto à atividade adulticida por meio da aplicação do bioensaio com garrafa do CDC. A fração obtida através da fase móvel de n-hexanos-clorofórmio 60:40% a 50:50% com valor de 0,5 Rf apresentou atividade adulticida de 100% na concentração de 0,2%. Durante a atividade de dissuasão da oviposição, a maior concentração de extrato (1000 ppm) apresentou repelência efetiva de 71,3 ± 4,4% e índice de atividade de oviposição de 0,6 ± 0,1. Durante a atividade de inibição da emergência de adultos, o valor médio de inibição da emergência (EI50) foi de 312,3 ppm. A partir do resultado da presente investigação, conclui-se que o extrato de n-hexano da planta inteira de C. botrys possui fortes atividades larvicida, pupicida, adulticida, dissuasora da oviposição e inibidora da emergência de adultos contra a Cx. quinquefasciatus.

Abstract This research aimed to investigate various mosquitocidal activities of Chenopodium botrys whole- plant n-hexane extract against Culex quinquefasciatus. The extract showed remarkable larvicidal, pupicidal, adulticidal, oviposition deterrent and adult emergence inhibitory activities against Cx. quinquefasciatus. During the larvicidal and pupicidal activities, the 24-hour lethal concentration (LC50) of extract against 2nd instar larvae, 4th instar larvae and pupae were 324.6, 495.6 and 950.8 ppm, respectively. During the CDC (Centers for Disease Control and Prevention) bottle bioassay for adulticidal activity, the median knockdown times (KDT50) at 1.25% concentration was 123.4 minutes. During the filter paper impregnation bioassay for adulticidal activity, the KDT50 value at 0.138 mg/cm2 concentration was 48.6 minutes. The extract was fractionated into 14 fractions through silica gel column chromatography which were then combined into six fractions on the basis of similar retention factor (Rf) value. These fractions were screened for adulticidal activity by applying CDC bottle bioassay. The fraction obtained through 60:40 to 50:50% n-hexanes-chloroform mobile phase with 0.5 Rf value showed 100% adulticidal activity at 0.2% concentration. During oviposition deterrent activity, the highest concentration (1000 ppm) showed 71.3 ± 4.4% effective repellence and 0.6 ± 0.1 oviposition activity index. During adult emergence inhibition activity, the median emergence inhibition (EI50) value was 312.3 ppm. From the outcome of the present investigation, it is concluded that the n-hexane extract of C. botrys whole- plant possesses strong larvicidal, pupicidal, adulticidal, oviposition deterrent and adult emergence inhibitory activities against Cx. quinquefasciatus.

Resumo Muitos microrganismos do solo, ou seja, bactérias e fungos produzem metabólitos secundários chamados antibióticos. Eles são usados para tratamento de algumas doenças bacterianas, fúngicas e protozoárias em humanos. Há necessidade de isolamento de um amplo espectro de antibióticos de microrganismos devido ao surgimento de resistência aos antibióticos. No presente estudo, duas bactérias produtoras de antibióticos, Klebsiella pneumoniae e Bacillus cereus, foram isoladas da indústria farmacêutica e de ração avícola de Hattar, Haripur, Paquistão. Um total de 10 amostras de resíduos foi coletado de diferentes indústrias (mármore, ghee, sabão, mineral, aço, ração para aves, farmacêutica, Qarshi, cosmética e vidro). Trinta e três cepas bacterianas foram isoladas de resíduos industriais dessas dez diferentes indústrias. Quatorze das 33 cepas bacterianas exibiram atividades antimicrobianas contra pelo menos um dos micróbios de teste considerados neste estudo, incluindo Escherchia coli, Staphylococcus aureus e Salmonella typhi. As bactérias foram isoladas pela técnica de placa de diluição em série padrão. A caracterização morfológica dos isolados foi feita por coloração de gram. Nove isolados bacterianos de 14 foram inicialmente identificados como B. cereus e cinco como K. pneumoniae por meio de caracterização bioquímica. As atividades antibacterianas foram testadas pelo método de difusão em poço. O número máximo de bactérias produtoras de antibióticos foi isolado da indústria farmacêutica e de ração avícola com base nos resultados da triagem primária, os isolados mais potenciais S9, S19, S20, S22 e S23 foram selecionados para a triagem secundária. A atividade máxima contra E. coli e S. aureus foi registrada pelo isolado bacteriano S19, ou seja, zonas de inibição de 6,5 mm e 9 mm, enquanto S20 mostrou zonas de 7,5 mm e 6 mm, respectivamente. A identificação molecular foi realizada com base na análise da sequência 16S rRNA. Finalmente, os isolados foram identificados como B. cereus número de acesso LC538271 e K. pneumoniae número de acesso MT078679. A análise do extrato bacteriano S20 por meio de GC-MS indicou a presença de oito compostos de natureza e estrutura diversas. O presente estudo sugere que resíduos da indústria farmacêutica e de ração para aves podem conter bactérias produtoras de antibióticos. Essas bactérias podem ser utilizadas para a produção de antibióticos B. cereus e K. pneumoniae isolados de resíduos de rações de aves e indústrias farmacêuticas têm potencial para produzir antibióticos e podem ser usados para controlar o crescimento microbiano.

Abstract Many soil microorganisms’ i.e., bacteria and fungi produce secondary metabolites called antibiotics. These are used for the treatment of some of the bacterial, fungal and protozoal diseases of humans. There is a need for isolation of a broad spectrum of antibiotics from microorganisms due to the emergence of antibiotic resistance. In the present study two antibiotic producing bacteria Klebsiella pneumoniae and Bacillus cereus were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry of Hattar, Haripur Pakistan. Total 10 waste samples were collected from different industries (Marble, Ghee, Soap, Mineral, Steel, Poultry Feed, Pharmaceutical, Qarshi, Cosmetic and Glass). Thirty-three bacterial strains were isolated from industrial wastes of these ten different industries. Fourteen out of thirty-three bacterial strains exhibited antimicrobial activities against at least one of the test microbes considered in this study including Escherchia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella typhi. The bacteria were isolated by standard serial dilution spread plate technique. Morphological characterization of the isolates was done by Gram staining. Nine bacterial isolates out of fourteen were initially identified as B. cereus and five as K. pneumoniae through biochemical characterization. The antibacterial activities were tested by well diffusion method. Maximum number of antibiotic producing bacteria were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry based on the results of primary screening, the most potential isolates S9, S19, S20, S22 and S23 were selected for secondary screening. The maximum activity against E. coli and S. aureus was recorded by bacterial isolate S19 i.e zones of inhibition of 6.5mm and 9mm while S20 showed 7.5mm and 6mm zones respectively. Molecular identification was carried out on the basis of 16S rRNA sequence analysis. Finally, the isolates were identified as B. cereus accession number LC538271and K. pneumoniae accession number MT078679. Analysis of bacterial extract S20 through GC-MS indicated the presence of 8 compounds of diverse nature and structure. Present study suggests that wastes of pharmaceutical and poultry feed industry may have antibiotic producing bacteria. These bacteria could be utilized for the production of antibiotics. B. cereus and K. pneumoniae isolated from wastes of poultry feed and pharmaceutical industries have the potential to produce antibiotics and could be used to control the microbial growth.

Resumo A tuberculose é uma doença transmissível com altas taxas de morbimortalidade nos países em desenvolvimento. O objetivo principal do estudo é comparar métodos convencionais, como cultura de bacilo álcool-ácido resistente (BAAR) e microscopia, com métodos de diagnóstico rápido. O objetivo secundário é comparar os achados histopatológicos e microbiológicos em pacientes com suspeita de linfadenite tubercular. Um total de 111 amostras (agosto de 2018 a setembro de 2019) de gânglios linfáticos foi processado para microscopia de AFB, culturas de AFB, teste de susceptibilidade a drogas (DST), histopatologia e Xpert Mycobacterium tuberculosis (MTB)/ensaios de resistência à rifampicina (RIF). Das 111 amostras de linfonodos, 6 (5,4%) foram positivas para baciloscopia de AFB, 84 (75,6%) foram positivas para cultura de AFB, 80 (70,7%) foram positivas para o GeneXpert e 102 (91,8%) foram indicativas de tuberculose para estudos histopatológicos. A positividade da cultura do tubo indicador de crescimento de micobactérias (MGIT) foi 84 (75,6%), maior que a cultura sólida de Lowenstein-Jensen (LJ), 74 (66,6%). As culturas positivas foram submetidas a DST fenotípico. Dois casos eram multirresistentes (MDR) ao DST, enquanto três casos eram resistentes à rifampicina no GeneXpert. A sensibilidade do GeneXpert foi 62% contra o método convencional de cultura AFB. O fraco desempenho dos métodos convencionais de diagnóstico de linfadenite requer metodologia de diagnóstico precoce e precisa. O teste Xpert MTB/RIF pode ajudar no tratamento de casos de tuberculose multirresistente. No entanto, métodos rápidos e convencionais devem ser usados para o isolamento completo do Mycobacterium tuberculosis.

Abstract Tuberculosis is a communicable disease with high morbidity and mortality rates in developing countries. The study's primary objective is to compare conventional methods such as acid-fast bacillus (AFB) culture and microscopy with rapid diagnostic methods. The secondary objective is to compare histopathological and microbiological findings in suspected patients with tubercular lymphadenitis. A total of 111 samples (August 2018 to September 2019) of lymph nodes were processed for AFB microscopy, AFB cultures, drug-susceptibility testing (DST), histopathology, and Xpert Mycobacterium Tuberculosis (MTB)/resistance to Rifampin (RIF) assays. Out of 111 lymph node samples, 6 (5.4%) were positive for AFB smear microscopy, 84 (75.6%) were positive for AFB culture, 80 (70.7%) were positive on Gene Xpert, and 102 (91.8%) were indicative of tuberculosis for histopathology studies. Mycobacteria growth indicator tube (MGIT) culture positivity was 84 (75.6%) higher than solid Lowenstein-Jensen (LJ) culture 74 (66.6%). Positive cultures underwent phenotypic DST. Two cases were Multidrug-resistant (MDR) on DST, while three cases were Rifampicin resistant on Gene Xpert. The sensitivity of Genexpert was (62%) against the conventional AFB culture method. The poor performance of conventional lymphadenitis diagnostic methods requires early and accurate diagnostic methodology. Xpert MTB/RIF test can help in the treatment of multidrug-resistant TB cases. Nonetheless, rapid and conventional methods should be used for complete isolation of Mycobacterium tuberculosis.

Resumo As doenças causadas pela traça humana continuam sendo um problema de saúde pediátrica nos países em desenvolvimento, incluindo o Paquistão. Este estudo teve como objetivo investigar a prevalência de Enterobius vermicularis em escolares de quatro distritos na região de Malakand, Paquistão. Quatrocentos espécimes fecais foram selecionados de maio de 2014 a julho de 2017, usando solução salina normal e solução de lugol iodo. Vinte e três (5,75%) indivíduos foram encontrados infectados por E. vermicularis. Cinco crianças (1,25%) foram infectadas apenas com E. vermicularis e dezoito (4,5%) foram misturadas com outros helmintos. Foram detectados E. vermicularis 23 (5,75%), ancilóstomo 11 (2,75%), Ascaris lumbricoides 5 (1,25%), Taenia saginata 2 (0,5%) e Trichuris trichuira 4 (1%). Com relação à idade, 5-8 anos foram mais parasitados, seguidos por 13-15 e 9-12 anos de idade (0,0296, P <0,05). Crianças do sexo masculino foram altamente (0,06700, P <0,05) infectadas do que as do sexo feminino. As crianças no distrito de Malakand foram encontradas mais infectadas, seguidas por Dir Upper, taxa de infecção semelhante foi observada em crianças dos distritos Lower Dir e Swat (0,0192, P <0,05). As crianças do nível primário foram altamente (0,0013, P <0,05) infectadas do que as dos níveis médio e alto. A enterobiose ainda é a doença parasitária mais comum em crianças. Os estudos sobre enterobiose devem ser conduzidos periodicamente para reconhecer a periculosidade dessa infecção parasitária em áreas remotas do país.

Abstract Illnesses caused by human pinworm remains a pediatric health problem in developing nations including Pakistan. This study aimed to investigate the prevalence of Enterobius vermicularis in school children of four districts in Malakand region, Pakistan. Four hundred faecal specimens were screened from May 2014 to July 2017 using normal saline and Lugol Iodine solution. Twenty three (5.75%) individuals were found infected with E. vermicularis. Five children (1.25%) were infected with only E. vermicularis and eighteen (4.5%) were mixed with other helminths. E. vermicularis 23 (5.75%), hookworm 11 (2.75%), Ascaris lumbricoides 5 (1.25%), Taenia saginata 2 (0.5%) and Trichuris trichuira 4 (1%) were detected. Age wise 5-8 years were more parasitized followed by 13-15 and 9-12 years of age (0.0296, P<0.05). Male children were highly (0.06700, P<0.05) infected than female. Children in Malakand district were found more infected followed by Dir Upper, similar infection rate was noted in children of districts Lower Dir and Swat (0.0192, P<0.05). Children in primary level were highly (0.0013, P<0.05) infected than those of middle and high levels. Enterobiosis is still the most common parasitic diseases in children. Studies on enterobiosis should be conducted time by time to recognize the hazardous of such parasitic infection in remote areas of the country.